Visceral leishmaniasis (VL), yang dikenali sebagai kala-azar di benua kecil India, ialah penyakit parasit yang disebabkan oleh protozoa berbendera Leishmania yang boleh membawa maut jika tidak dirawat dengan segera. Lalat pasir Phlebotomus argentipes ialah satu-satunya vektor VL yang disahkan di Asia Tenggara, di mana ia dikawal oleh penyemburan sisa dalaman (IRS), racun serangga sintetik. Penggunaan DDT dalam program kawalan VL telah menghasilkan pembangunan rintangan pada lalat pasir, jadi DDT telah digantikan oleh insektisida alpha-cypermethrin. Walau bagaimanapun, alpha-cypermethrin bertindak sama dengan DDT, jadi risiko rintangan pada lalat pasir meningkat di bawah tekanan yang disebabkan oleh pendedahan berulang kepada racun serangga ini. Dalam kajian ini, kami menilai kerentanan nyamuk liar dan keturunan F1 mereka menggunakan bioassay botol CDC.
Kami mengumpul nyamuk dari 10 kampung di daerah Muzaffarpur di Bihar, India. Lapan kampung terus menggunakan potensi tinggicypermethrinuntuk penyemburan dalaman, satu kampung berhenti menggunakan cypermethrin berkeupayaan tinggi untuk penyemburan dalaman, dan satu kampung tidak pernah menggunakan cypermethrin berkeupayaan tinggi untuk penyemburan dalaman. Nyamuk yang dikumpul telah didedahkan kepada dos diagnostik yang telah ditetapkan untuk masa yang ditetapkan (3 μg/ml selama 40 minit), dan kadar knockdown dan kematian direkodkan 24 jam selepas pendedahan.
Kadar pembunuhan nyamuk liar adalah antara 91.19% hingga 99.47%, dan generasi F1 mereka adalah antara 91.70% hingga 98.89%. Dua puluh empat jam selepas pendedahan, kematian nyamuk liar adalah antara 89.34% hingga 98.93%, dan generasi F1 mereka adalah antara 90.16% hingga 98.33%.
Keputusan kajian ini menunjukkan bahawa rintangan mungkin berkembang di P. argentipes, menunjukkan keperluan untuk pemantauan dan kewaspadaan yang berterusan untuk mengekalkan kawalan sebaik pembasmian telah dicapai.
Visceral leishmaniasis (VL), dikenali sebagai kala-azar di benua kecil India, ialah penyakit parasit yang disebabkan oleh protozoa berbendera Leishmania dan dihantar melalui gigitan lalat pasir betina yang dijangkiti (Diptera: Myrmecophaga). Lalat pasir adalah satu-satunya vektor VL yang disahkan di Asia Tenggara. India hampir mencapai matlamat untuk menghapuskan VL. Walau bagaimanapun, untuk mengekalkan kadar insiden yang rendah selepas pembasmian, adalah penting untuk mengurangkan populasi vektor untuk mengelakkan potensi penularan.
Kawalan nyamuk di Asia Tenggara dicapai melalui penyemburan sisa dalaman (IRS) menggunakan racun serangga sintetik. Tingkah laku rehat rahsia kaki perak menjadikannya sasaran yang sesuai untuk kawalan racun serangga melalui penyemburan sisa dalaman [1]. Penyemburan sisa dalaman dichlorodiphenyltrichloroethane (DDT) di bawah Program Kawalan Malaria Kebangsaan di India mempunyai kesan limpahan yang ketara dalam mengawal populasi nyamuk dan mengurangkan kes VL dengan ketara [2]. Kawalan VL yang tidak dirancang ini mendorong Program Pembasmian VL India untuk mengguna pakai semburan sisa dalaman sebagai kaedah utama kawalan kaki perak. Pada tahun 2005, kerajaan India, Bangladesh, dan Nepal menandatangani memorandum persefahaman dengan matlamat untuk menghapuskan VL menjelang 2015 [3]. Usaha pembasmian, yang melibatkan gabungan kawalan vektor dan diagnosis pantas serta rawatan kes manusia, bertujuan untuk memasuki fasa penyatuan menjelang 2015, sasaran yang kemudiannya disemak semula kepada 2017 dan kemudian 2020.[4] Pelan hala tuju global baharu untuk menghapuskan penyakit tropika yang diabaikan termasuk penghapusan VL menjelang 2030.[5]
Memandangkan India memasuki fasa pasca pembasmian BCVD, adalah penting untuk memastikan rintangan yang ketara terhadap beta-cypermethrin tidak berkembang. Sebab rintangan adalah bahawa kedua-dua DDT dan cypermethrin mempunyai mekanisme tindakan yang sama, iaitu, mereka menyasarkan protein VGSC [21]. Oleh itu, risiko perkembangan rintangan dalam lalat pasir mungkin meningkat oleh tekanan yang disebabkan oleh pendedahan biasa kepada cypermethrin yang sangat kuat. Oleh itu, adalah penting untuk memantau dan mengenal pasti potensi populasi lalat pasir yang tahan terhadap racun serangga ini. Dalam konteks ini, objektif kajian ini adalah untuk memantau status kerentanan lalat pasir liar menggunakan dos diagnostik dan tempoh pendedahan yang ditentukan oleh Chaubey et al. [20] mengkaji P. argentipes dari kampung berbeza di daerah Muzaffarpur Bihar, India, yang secara berterusan menggunakan sistem penyemburan dalaman yang dirawat dengan cypermethrin (kampung IPS berterusan). Status kerentanan P. argentipes liar dari kampung yang telah berhenti menggunakan sistem penyemburan dalaman yang dirawat cypermethrin (bekas kampung IPS) dan mereka yang tidak pernah menggunakan sistem penyemburan dalaman yang dirawat cypermethrin (kampung bukan IPS) dibandingkan menggunakan bioassay botol CDC.
Sepuluh kampung telah dipilih untuk kajian (Rajah 1; Jadual 1), di mana lapan daripadanya mempunyai sejarah penyemburan dalaman berterusan piretroid sintetik (hipermetrin; ditetapkan sebagai kampung hipermetrin berterusan) dan mempunyai kes VL (sekurang-kurangnya satu kes) dalam tempoh 3 tahun yang lalu. Daripada baki dua buah kampung dalam kajian, satu kampung yang tidak melaksanakan semburan tertutup beta-cypermethrin (kampung semburan bukan dalam rumah) telah dipilih sebagai kampung kawalan dan kampung lain yang mempunyai semburan dalam rumah sekejap-sekejap beta-cypermethrin (kampung semburan dalaman berselang-seli/kampung semburan dalaman bekas) telah dipilih sebagai kampung kawalan. Pemilihan kampung ini adalah berdasarkan penyelarasan dengan Jabatan Kesihatan dan Pasukan Penyembur Dalam Ruangan dan pengesahan Pelan Tindakan Mikro Semburan Dalaman di Daerah Muzaffarpur.
Peta geografi daerah Muzaffarpur menunjukkan lokasi kampung yang termasuk dalam kajian (1–10). Lokasi kajian: 1, Manifulkaha; 2, Ramdas Majhauli; 3, Madhubani; 4, Anandpur Haruni; 5, Pandey; 6, Hirapur; 7, Madhopur Hazari; 8, Hamidpur; 9, Noonfara; 10, Simara. Peta telah disediakan menggunakan perisian QGIS (versi 3.30.3) dan Open Assessment Shapefile.
Botol untuk eksperimen pendedahan telah disediakan mengikut kaedah Chaubey et al. [20] dan Denlinger et al. [22]. Secara ringkas, 500 mL botol kaca telah disediakan sehari sebelum eksperimen dan dinding dalam botol disalut dengan racun serangga yang ditunjukkan (dos diagnostik α-cypermethrin ialah 3 μg/mL) dengan menggunakan larutan aseton racun serangga (2.0 mL) ke bahagian bawah, dinding dan penutup botol. Setiap botol kemudiannya dikeringkan pada roller mekanikal selama 30 minit. Pada masa ini, buka penutup penutup perlahan-lahan untuk membenarkan aseton tersejat. Selepas 30 minit pengeringan, keluarkan penutup dan putar botol sehingga semua aseton tersejat. Botol-botol itu kemudian dibiarkan terbuka hingga kering semalaman. Bagi setiap ujian ulangan, satu botol, digunakan sebagai kawalan, disalut dengan 2.0 mL aseton. Semua botol telah digunakan semula sepanjang eksperimen selepas pembersihan yang sesuai mengikut prosedur yang diterangkan oleh Denlinger et al. dan Pertubuhan Kesihatan Sedunia [22, 23].
Pada hari selepas penyediaan racun serangga, 30–40 nyamuk yang ditangkap liar (betina yang kelaparan) dikeluarkan dari sangkar dalam botol dan ditiup perlahan-lahan ke dalam setiap botol. Lebih kurang bilangan lalat yang sama digunakan untuk setiap botol bersalut racun serangga, termasuk kawalan. Ulangi ini sekurang-kurangnya lima hingga enam kali di setiap kampung. Selepas 40 minit terdedah kepada racun serangga, bilangan lalat yang tumbang direkodkan. Semua lalat ditangkap dengan penyedut mekanikal, diletakkan di dalam bekas kadbod pint yang ditutup dengan jaringan halus, dan diletakkan di dalam inkubator yang berasingan di bawah kelembapan dan keadaan suhu yang sama dengan sumber makanan yang sama (bebola kapas yang direndam dalam larutan gula 30%) sebagai koloni yang tidak dirawat. Kematian direkodkan 24 jam selepas terdedah kepada racun serangga. Semua nyamuk dibedah dan diperiksa untuk mengesahkan identiti spesies. Prosedur yang sama dilakukan dengan lalat anak F1. Kadar knockdown dan kematian direkodkan 24 jam selepas pendedahan. Jika mortaliti dalam botol kawalan adalah < 5%, tiada pembetulan mortaliti dibuat dalam replika. Jika mortaliti dalam botol kawalan adalah ≥ 5% dan ≤ 20%, mortaliti dalam botol ujian replika itu telah diperbetulkan menggunakan formula Abbott. Jika kematian dalam kumpulan kawalan melebihi 20%, keseluruhan kumpulan ujian dibuang [24, 25, 26].
Purata kematian nyamuk P. argentipes yang ditangkap liar. Bar ralat mewakili ralat standard bagi min. Persilangan dua garisan mendatar merah dengan graf (masing-masing 90% dan 98% kematian) menunjukkan tetingkap kematian di mana rintangan boleh berkembang.[25]
Purata kematian progeni F1 P. argentipes yang ditangkap liar. Bar ralat mewakili ralat standard bagi min. Lengkung yang bersilang oleh dua garisan mendatar merah (masing-masing 90% dan 98% kematian) mewakili julat kematian di mana rintangan boleh berkembang[25].
Nyamuk di kampung kawalan/bukan IRS (Manifulkaha) didapati sangat sensitif terhadap racun serangga. Purata kematian (±SE) nyamuk yang ditangkap liar 24 jam selepas ketukan dan pendedahan ialah 99.47 ± 0.52% dan 98.93 ± 0.65%, masing-masing, dan purata kematian anak F1 ialah 98.89 ± 1.11% dan 98.3% (Jadual ± 1.11% dan 98.3% masing-masing. 3).
Keputusan kajian ini menunjukkan bahawa lalat pasir berkaki perak mungkin mengalami rintangan terhadap pyrethroid (SP) α-cypermethrin sintetik di kampung-kampung di mana pyrethroid (SP) α-cypermethrin digunakan secara rutin. Sebaliknya, lalat pasir berkaki perak yang dikutip dari kampung yang tidak dilindungi oleh program IRS/kawalan didapati sangat terdedah. Memantau kerentanan populasi lalat pasir liar adalah penting untuk memantau keberkesanan racun serangga yang digunakan, kerana maklumat ini boleh membantu dalam menguruskan rintangan racun serangga. Tahap rintangan DDT yang tinggi telah dilaporkan secara kerap dalam lalat pasir dari kawasan endemik Bihar disebabkan tekanan pemilihan sejarah daripada IRS menggunakan racun serangga ini [1].
Kami mendapati P. argentipes sangat sensitif terhadap pyrethroids, dan ujian lapangan di India, Bangladesh dan Nepal menunjukkan bahawa IRS mempunyai keberkesanan entomologi yang tinggi apabila digunakan dalam kombinasi dengan cypermethrin atau deltamethrin [19, 26, 27, 28, 29]. Baru-baru ini, Roy et al. [18] melaporkan bahawa P. argentipes telah membangunkan ketahanan terhadap pyrethroids di Nepal. Kajian kerentanan lapangan kami menunjukkan bahawa lalat pasir berkaki perak yang dikumpul dari kampung yang tidak terdedah kepada IRS sangat terdedah, tetapi lalat yang dikumpul dari IRS berselang/bekas IRS dan kampung IRS berterusan (kematian berjulat antara 90% hingga 97% kecuali lalat pasir dari Anandpur-Haruni yang mempunyai 89.34% kematian pada pendedahan pada 24 jam selepas lima tahun berkemungkinan tinggi). Satu sebab yang mungkin untuk perkembangan rintangan ini adalah tekanan yang dikenakan oleh penyemburan rutin dalaman (IRS) dan program penyemburan tempatan berasaskan kes, yang merupakan prosedur standard untuk menguruskan wabak kala-azar di kawasan/blok/kampung endemik (Prosedur Operasi Standard untuk Penyiasatan dan Pengurusan Wabak [30]. Hasil kajian ini memberikan petunjuk awal terhadap tekanan selektif sejarah yang sangat berkesan. untuk wilayah ini, yang diperoleh menggunakan bioassay botol CDC, tidak tersedia untuk perbandingan; semua kajian terdahulu telah memantau kerentanan P. argentipes menggunakan kertas yang diresapi racun serangga WHO Dos diagnostik racun serangga dalam jalur ujian WHO adalah kepekatan pengenalpastian racun serangga yang disyorkan untuk digunakan terhadap vektor malaria (Anopheles gambiae pasir operasi ini kurang kebolehgunaan). lebih kerap daripada nyamuk, dan menghabiskan lebih banyak masa bersentuhan dengan substrat dalam bioassay [23].
Piretroid sintetik telah digunakan di kawasan endemik VL Nepal sejak 1992, berselang-seli dengan SPs alpha-cypermethrin dan lambda-cyhalothrin untuk kawalan lalat pasir [31], dan deltamethrin juga telah digunakan di Bangladesh sejak 2012 [32]. Rintangan fenotip telah dikesan dalam populasi liar lalat pasir berkaki perak di kawasan di mana piretroid sintetik telah digunakan untuk masa yang lama [18, 33, 34]. Mutasi tidak sinonim (L1014F) telah dikesan dalam populasi liar lalat pasir India dan telah dikaitkan dengan rintangan kepada DDT, menunjukkan bahawa rintangan piretroid timbul pada tahap molekul, kerana kedua-dua DDT dan piretroid (alpha-cypermethrin) mensasarkan gen yang sama dalam sistem saraf serangga [17, 34]. Oleh itu, penilaian sistematik terhadap kerentanan cypermethrin dan pemantauan rintangan nyamuk adalah penting semasa tempoh pembasmian dan selepas pembasmian.
Had potensi kajian ini ialah kami menggunakan bioassay vial CDC untuk mengukur kerentanan, tetapi semua perbandingan menggunakan hasil daripada kajian terdahulu menggunakan kit bioassay WHO. Keputusan daripada dua bioassay mungkin tidak dapat dibandingkan secara langsung kerana bioassay vial CDC mengukur ketukan pada akhir tempoh diagnostik, manakala bioassay kit WHO mengukur kematian pada 24 atau 72 jam selepas pendedahan (yang terakhir untuk sebatian bertindak perlahan) [35]. Satu lagi had potensi ialah bilangan kampung IRS dalam kajian ini berbanding dengan satu kampung bukan IRS dan satu kampung bukan IRS/bekas IRS. Kita tidak boleh menganggap bahawa tahap kerentanan vektor nyamuk yang diperhatikan di setiap kampung dalam satu daerah mewakili tahap kerentanan di kampung dan daerah lain di Bihar. Memandangkan India memasuki fasa pasca penghapusan virus leukemia, adalah penting untuk mencegah perkembangan rintangan yang ketara. Pemantauan pantas terhadap rintangan dalam populasi lalat pasir dari daerah, blok dan kawasan geografi yang berbeza diperlukan. Data yang dibentangkan dalam kajian ini adalah awal dan harus disahkan dengan perbandingan dengan kepekatan pengenalan yang diterbitkan oleh Pertubuhan Kesihatan Sedunia [35] untuk mendapatkan idea yang lebih spesifik tentang status kerentanan P. argentipes di kawasan ini sebelum mengubah suai program kawalan vektor untuk mengekalkan populasi lalat pasir yang rendah dan menyokong penghapusan virus leukemia.
Nyamuk P. argentipes, vektor virus leukosis, mungkin mula menunjukkan tanda-tanda awal penentangan terhadap cypermethrin yang sangat berkesan. Pemantauan tetap rintangan racun serangga dalam populasi liar P. argentipes adalah perlu untuk mengekalkan kesan epidemiologi campur tangan kawalan vektor. Putaran racun serangga dengan mod tindakan dan/atau penilaian dan pendaftaran racun serangga baharu adalah perlu dan disyorkan untuk menguruskan rintangan racun serangga dan menyokong penghapusan virus leukosis di India.
Masa siaran: Feb-17-2025