Penggunaan racun perosak sintetik yang meluas telah membawa kepada banyak masalah, termasuk kemunculan organisma yang tahan, kemerosotan alam sekitar dan kemudaratan kepada kesihatan manusia.Oleh itu, racun perosak mikrob baharu yang selamat untuk kesihatan manusia dan alam sekitar amat diperlukan dengan segera.Dalam kajian ini, biosurfaktan rhamnolipid yang dihasilkan oleh Enterobacter cloacae SJ2 digunakan untuk menilai ketoksikan kepada larva nyamuk (Culex quinquefasciatus) dan anai-anai (Odontotermes obesus).Keputusan menunjukkan bahawa terdapat kadar kematian bergantung kepada dos antara rawatan.Nilai LC50 (50% kepekatan maut) pada 48 jam untuk biosurfaktan anai-anai dan larva nyamuk ditentukan menggunakan kaedah pemasangan lengkung regresi tak linear.Keputusan menunjukkan bahawa nilai LC50 48 jam (95% selang keyakinan) aktiviti larvikidal dan antianai-anai biosurfaktan adalah masing-masing 26.49 mg/L (julat 25.40 hingga 27.57) dan 33.43 mg/L (julat 31.09 hingga 35.68).Menurut pemeriksaan histopatologi, rawatan dengan biosurfaktan menyebabkan kerosakan teruk pada tisu organel larva dan anai-anai.Hasil kajian ini menunjukkan bahawa biosurfaktan mikrob yang dihasilkan oleh Enterobacter cloacae SJ2 adalah alat yang sangat baik dan berpotensi berkesan untuk kawalan Cx.quinquefasciatus dan O. obesus.
Negara tropika mengalami sejumlah besar penyakit bawaan nyamuk1.Kaitan penyakit bawaan nyamuk adalah meluas.Lebih daripada 400,000 orang mati akibat malaria setiap tahun, dan beberapa bandar utama sedang mengalami wabak penyakit serius seperti denggi, demam kuning, chikungunya dan Zika.2 Penyakit bawaan vektor dikaitkan dengan satu daripada enam jangkitan di seluruh dunia, dengan nyamuk menyebabkan paling banyak kes ketara3 ,4.Culex, Anopheles dan Aedes ialah tiga genera nyamuk yang paling kerap dikaitkan dengan penularan penyakit5.Prevalens demam denggi, jangkitan yang disebarkan oleh nyamuk Aedes aegypti, telah meningkat sejak sedekad lalu dan menimbulkan ancaman kesihatan awam yang ketara4,7,8.Menurut Pertubuhan Kesihatan Sedunia (WHO), lebih daripada 40% penduduk dunia berisiko menghidap demam denggi, dengan 50–100 juta kes baharu berlaku setiap tahun di lebih 100 negara9,10,11.Demam denggi telah menjadi masalah kesihatan awam yang utama kerana kejadiannya telah meningkat di seluruh dunia12,13,14.Anopheles gambiae, biasanya dikenali sebagai nyamuk Anopheles Afrika, merupakan vektor malaria manusia yang paling penting di kawasan tropika dan subtropika15.Virus West Nile, St. Louis encephalitis, Japanese encephalitis, dan jangkitan virus pada kuda dan burung disebarkan oleh nyamuk Culex, yang sering dipanggil nyamuk rumah biasa.Selain itu, mereka juga pembawa penyakit bakteria dan parasit16.Terdapat lebih daripada 3,000 spesies anai-anai di dunia, dan ia telah wujud selama lebih daripada 150 juta tahun17.Kebanyakan perosak hidup di dalam tanah dan memakan kayu dan produk kayu yang mengandungi selulosa.Anai-anai India Odontotermes obesus ialah perosak penting yang menyebabkan kerosakan teruk pada tanaman penting dan pokok ladang18.Di kawasan pertanian, serangan anai-anai pada pelbagai peringkat boleh menyebabkan kerosakan ekonomi yang besar kepada pelbagai tanaman, spesies pokok dan bahan binaan.Anai-anai juga boleh menyebabkan masalah kesihatan manusia19.
Isu tentangan daripada mikroorganisma dan perosak dalam bidang farmaseutikal dan pertanian masa kini adalah kompleks20,21.Oleh itu, kedua-dua syarikat harus mencari antimikrobial baru yang kos efektif dan biopestisid selamat.Racun perosak sintetik kini tersedia dan telah terbukti berjangkit dan menghalau serangga berfaedah bukan sasaran22.Dalam beberapa tahun kebelakangan ini, penyelidikan mengenai biosurfaktan telah berkembang kerana aplikasinya dalam pelbagai industri.Biosurfaktan sangat berguna dan penting dalam pertanian, pemulihan tanah, pengekstrakan petroleum, penyingkiran bakteria dan serangga, dan pemprosesan makanan23,24.Biosurfaktan atau surfaktan mikrob ialah bahan kimia biosurfaktan yang dihasilkan oleh mikroorganisma seperti bakteria, yis dan kulat di habitat pantai dan kawasan tercemar minyak25,26.Surfaktan terbitan kimia dan biosurfaktan ialah dua jenis yang diperolehi terus daripada persekitaran semula jadi27.Pelbagai biosurfaktan diperoleh daripada habitat marin28,29.Oleh itu, saintis sedang mencari teknologi baharu untuk penghasilan biosurfaktan berasaskan bakteria semula jadi30,31.Kemajuan dalam penyelidikan sedemikian menunjukkan kepentingan sebatian biologi ini untuk perlindungan alam sekitar32.Bacillus, Pseudomonas, Rhodococcus, Alcaligenes, Corynebacterium dan genera bakteria ini adalah wakil yang dikaji dengan baik23,33.
Terdapat banyak jenis biosurfaktan dengan pelbagai aplikasi34.Kelebihan ketara sebatian ini ialah sebahagian daripadanya mempunyai aktiviti antibakteria, larvicid dan insektisida.Ini bermakna ia boleh digunakan dalam industri pertanian, kimia, farmaseutikal dan kosmetik35,36,37,38.Oleh kerana biosurfaktan secara amnya boleh terbiodegradasi dan berfaedah kepada alam sekitar, ia digunakan dalam program pengurusan perosak bersepadu untuk melindungi tanaman39.Oleh itu, pengetahuan asas telah diperolehi tentang aktiviti larvikidal dan antianai-anai biosurfaktan mikrob yang dihasilkan oleh Enterobacter cloacae SJ2.Kami memeriksa mortaliti dan perubahan histologi apabila terdedah kepada kepekatan biosurfaktan rhamnolipid yang berbeza.Di samping itu, kami menilai program komputer Quantitative Structure-Activity (QSAR) yang digunakan secara meluas, Ecological Structure-Activity (ECOSAR) untuk menentukan ketoksikan akut untuk mikroalga, daphnia dan ikan.
Dalam kajian ini, aktiviti antianai-anai (ketoksikan) biosurfaktan yang telah dimurnikan pada pelbagai kepekatan antara 30 hingga 50 mg/ml (pada selang 5 mg/ml) telah diuji terhadap anai-anai India, O. obesus dan spesies keempat )Evaluate.Larva instar Cx.Larva nyamuk quinquefasciatus.Kepekatan LC50 biosurfaktan selama 48 jam terhadap O. obesus dan Cx.C. solanacearum.Larva nyamuk dikenal pasti menggunakan kaedah pemasangan lengkung regresi tak linear.Keputusan menunjukkan bahawa kematian anai-anai meningkat dengan peningkatan kepekatan biosurfaktan.Keputusan menunjukkan bahawa biosurfaktan mempunyai aktiviti larvikidal (Rajah 1) dan aktiviti anti-anai-anai (Rajah 2), dengan nilai LC50 48 jam (95% CI) sebanyak 26.49 mg/L (25.40 hingga 27.57 ) dan 33.43 mg/ l (Rajah 31.09 hingga 35.68), masing-masing (Jadual 1).Dari segi ketoksikan akut (48 jam), biosurfaktan dikelaskan sebagai "memudaratkan" kepada organisma yang diuji.Biosurfaktan yang dihasilkan dalam kajian ini menunjukkan aktiviti larvikid yang sangat baik dengan 100% kematian dalam tempoh 24-48 jam pendedahan.
Kira nilai LC50 untuk aktiviti larvikidal.Pemasangan lengkung regresi bukan linear (garis pepejal) dan selang keyakinan 95% (kawasan berlorek) untuk kematian relatif (%).
Kira nilai LC50 untuk aktiviti anti-anai-anai.Pemasangan lengkung regresi bukan linear (garis pepejal) dan selang keyakinan 95% (kawasan berlorek) untuk kematian relatif (%).
Pada akhir eksperimen, perubahan morfologi dan anomali diperhatikan di bawah mikroskop.Perubahan morfologi diperhatikan dalam kumpulan kawalan dan dirawat pada pembesaran 40x.Seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 3, kemerosotan pertumbuhan berlaku dalam kebanyakan larva yang dirawat dengan biosurfaktan.Rajah 3a menunjukkan Cx biasa.quinquefasciatus, Rajah 3b menunjukkan Cx anomali.Menyebabkan lima larva nematod.
Kesan dos sublethal (LC50) biosurfaktan ke atas pembangunan larva Culex quinquefasciatus.Imej mikroskop cahaya (a) Cx biasa pada pembesaran 40×.quinquefasciatus (b) Cx tidak normal.Menyebabkan lima larva nematod.
Dalam kajian ini, pemeriksaan histologi larva yang dirawat (Rajah 4) dan anai-anai (Rajah 5) mendedahkan beberapa keabnormalan, termasuk pengurangan kawasan perut dan kerosakan pada otot, lapisan epitelium dan kulit.usus tengah.Histologi mendedahkan mekanisme aktiviti perencatan biosurfaktan yang digunakan dalam kajian ini.
Histopatologi larva Cx instar ke-4 biasa yang tidak dirawat.larva quinquefasciatus (kawalan: (a,b)) dan dirawat dengan biosurfaktan (rawatan: (c,d)).Anak panah menunjukkan epitelium usus (epi), nukleus (n) dan otot (mu) yang dirawat.Bar = 50 µm.
Histopatologi O. obesus yang tidak dirawat normal (kawalan: (a,b)) dan biosurfaktan dirawat (rawatan: (c,d)).Anak panah menunjukkan epitelium usus (epi) dan otot (mu), masing-masing.Bar = 50 µm.
Dalam kajian ini, ECOSAR digunakan untuk meramalkan ketoksikan akut produk biosurfaktan rhamnolipid kepada pengeluar utama (alga hijau), pengguna primer (kutu air) dan pengguna sekunder (ikan).Program ini menggunakan model kompaun struktur aktiviti kuantitatif yang canggih untuk menilai ketoksikan berdasarkan struktur molekul.Model ini menggunakan perisian struktur-aktiviti (SAR) untuk mengira ketoksikan akut dan jangka panjang bahan kepada spesies akuatik.Secara khusus, Jadual 2 meringkaskan anggaran purata kepekatan maut (LC50) dan purata kepekatan berkesan (EC50) untuk beberapa spesies.Ketoksikan yang disyaki telah dikategorikan kepada empat tahap menggunakan Sistem Pengelasan dan Pelabelan Bahan Kimia Harmoni Secara Global (Jadual 3).
Kawalan penyakit bawaan vektor, terutamanya strain nyamuk dan nyamuk Aedes.Orang Mesir, sekarang kerja susah 40,41,42,43,44,45,46.Walaupun beberapa racun perosak yang tersedia secara kimia, seperti piretroid dan organofosfat, agak bermanfaat, ia menimbulkan risiko besar kepada kesihatan manusia, termasuk diabetes, gangguan pembiakan, gangguan saraf, kanser dan penyakit pernafasan.Lebih-lebih lagi, dari masa ke masa, serangga ini boleh menjadi tahan terhadapnya13,43,48.Oleh itu, langkah kawalan biologi yang berkesan dan mesra alam akan menjadi kaedah kawalan nyamuk yang lebih popular49,50.Benelli51 mencadangkan agar kawalan awal vektor nyamuk akan lebih berkesan di kawasan bandar, tetapi mereka tidak mengesyorkan penggunaan racun larva di kawasan luar bandar52.Tom et al 53 juga mencadangkan bahawa mengawal nyamuk pada peringkat belum matang akan menjadi strategi yang selamat dan mudah kerana mereka lebih sensitif terhadap agen kawalan 54 .
Pengeluaran biosurfaktan oleh strain yang kuat (Enterobacter cloacae SJ2) menunjukkan keberkesanan yang konsisten dan menjanjikan.Kajian terdahulu kami melaporkan bahawa Enterobacter cloacae SJ2 mengoptimumkan pengeluaran biosurfaktan menggunakan parameter fizikokimia26.Menurut kajian mereka, keadaan optimum untuk penghasilan biosurfaktan oleh pengasingan E. kloaka yang berpotensi adalah pengeraman selama 36 jam, pengadukan pada 150 rpm, pH 7.5, 37 °C, kemasinan 1 ppt, 2% glukosa sebagai sumber karbon, 1 % yis. .ekstrak digunakan sebagai sumber nitrogen untuk mendapatkan 2.61 g/L biosurfaktan.Di samping itu, biosurfaktan telah dicirikan menggunakan TLC, FTIR dan MALDI-TOF-MS.Ini mengesahkan bahawa rhamnolipid adalah biosurfaktan.Biosurfaktan glikolipid ialah kelas yang paling intensif dikaji bagi jenis biosurfaktan lain55.Ia terdiri daripada bahagian karbohidrat dan lipid, terutamanya rantai asid lemak.Antara glikolipid, wakil utama ialah rhamnolipid dan sophorolipid56.Rhamnolipid mengandungi dua bahagian rhamnose yang dikaitkan dengan asid mono‐ atau di‐β‐hidroksidekanoik 57 .Penggunaan rhamnolipid dalam industri perubatan dan farmaseutikal sudah mantap 58 , sebagai tambahan kepada penggunaannya baru-baru ini sebagai racun perosak 59 .
Interaksi biosurfaktan dengan kawasan hidrofobik sifon pernafasan membolehkan air melalui rongga stomatanya, dengan itu meningkatkan sentuhan larva dengan persekitaran akuatik.Kehadiran biosurfaktan juga mempengaruhi trakea, yang panjangnya hampir dengan permukaan, yang memudahkan larva merangkak ke permukaan dan bernafas.Akibatnya, tegangan permukaan air berkurangan.Oleh kerana larva tidak boleh melekat pada permukaan air, ia jatuh ke dasar tangki, mengganggu tekanan hidrostatik, mengakibatkan perbelanjaan tenaga yang berlebihan dan kematian akibat lemas38,60.Keputusan yang sama diperolehi oleh Ghribi61, di mana biosurfaktan yang dihasilkan oleh Bacillus subtilis mempamerkan aktiviti larvikidal terhadap Ephestia kuehniella.Begitu juga, aktiviti larvasida Cx.Das dan Mukherjee23 juga menilai kesan lipopeptida kitaran pada larva quinquefasciatus.
Keputusan kajian ini melibatkan aktiviti larvikidal biosurfaktan rhamnolipid terhadap Cx.Pembunuhan nyamuk quinquefasciatus adalah konsisten dengan keputusan yang diterbitkan sebelum ini.Sebagai contoh, biosurfaktan berasaskan surfaktan yang dihasilkan oleh pelbagai bakteria genus Bacillus digunakan.dan Pseudomonas spp.Beberapa laporan awal64,65,66 melaporkan aktiviti membunuh larva biosurfaktan lipopeptida daripada Bacillus subtilis23.Deepali et al.63 mendapati bahawa biosurfaktan rhamnolipid yang diasingkan daripada Stenotropomonas maltophilia mempunyai aktiviti larvasida yang kuat pada kepekatan 10 mg/L.Silva et al.67 melaporkan aktiviti larvikidal biosurfaktan rhamnolipid terhadap Ae pada kepekatan 1 g/L.Aedes aegypti.Kanakdande et al.68 melaporkan bahawa biosurfaktan lipopeptida yang dihasilkan oleh Bacillus subtilis menyebabkan kematian keseluruhan dalam larva Culex dan anai-anai dengan pecahan lipofilik Eucalyptus.Begitu juga, Masendra et al.69 melaporkan kematian semut pekerja (Cryptotermes cynocephalus Light.) sebanyak 61.7% dalam pecahan lipofilik n -heksana dan EtOAc ekstrak mentah E..
Parthipan et al 70 melaporkan penggunaan insektisida biosurfaktan lipopeptida yang dihasilkan oleh Bacillus subtilis A1 dan Pseudomonas stutzeri NA3 terhadap Anopheles Stephensi, vektor parasit malaria Plasmodium.Mereka memerhatikan bahawa larva dan pupa bertahan lebih lama, mempunyai tempoh oviposisi yang lebih pendek, steril, dan mempunyai jangka hayat yang lebih pendek apabila dirawat dengan kepekatan biosurfaktan yang berbeza.Nilai LC50 yang diperhatikan bagi B. subtilis biosurfaktan A1 masing-masing adalah 3.58, 4.92, 5.37, 7.10 dan 7.99 mg/L untuk keadaan larva yang berbeza (iaitu larva I, II, III, IV dan pupa peringkat).Sebagai perbandingan, biosurfaktan untuk peringkat larva I-IV dan peringkat pupa Pseudomonas stutzeri NA3 masing-masing adalah 2.61, 3.68, 4.48, 5.55 dan 6.99 mg/L.Fenologi tertunda larva dan pupa yang masih hidup dianggap sebagai hasil daripada gangguan fisiologi dan metabolik yang ketara yang disebabkan oleh rawatan racun serangga71.
Wickerhamomyces anomalus strain CCMA 0358 menghasilkan biosurfaktan dengan 100% aktiviti larvasida terhadap nyamuk Aedes.aegypti selang 24 jam 38 adalah lebih tinggi daripada yang dilaporkan oleh Silva et al.Biosurfaktan yang dihasilkan daripada Pseudomonas aeruginosa menggunakan minyak bunga matahari sebagai sumber karbon telah terbukti membunuh 100% larva dalam masa 48 jam 67 .Abinaya et al.72 dan Pradhan et al.73 juga menunjukkan kesan larvikidal atau insektisida surfaktan yang dihasilkan oleh beberapa pencilan genus Bacillus.Kajian yang diterbitkan sebelum ini oleh Senthil-Nathan et al.mendapati 100% larva nyamuk yang terdedah kepada lagun tumbuhan berkemungkinan akan mati.74.
Menilai kesan sublethal racun serangga pada biologi serangga adalah penting untuk program pengurusan perosak bersepadu kerana dos/kepekatan sublethal tidak membunuh serangga tetapi boleh mengurangkan populasi serangga pada generasi akan datang dengan mengganggu ciri biologi10.Siqueira et al 75 memerhatikan aktiviti larvikidal lengkap (100% kematian) biosurfaktan rhamnolipid (300 mg/ml) apabila diuji pada pelbagai kepekatan antara 50 hingga 300 mg/ml.Peringkat larva strain Aedes aegypti.Mereka menganalisis kesan masa kepada kematian dan kepekatan sublethal pada kemandirian larva dan aktiviti berenang.Di samping itu, mereka memerhatikan penurunan dalam kelajuan berenang selepas 24-48 jam pendedahan kepada kepekatan sublethal biosurfaktan (cth, 50 mg/mL dan 100 mg/mL).Racun yang mempunyai peranan sublethal yang menjanjikan dianggap lebih berkesan dalam menyebabkan pelbagai kerosakan kepada perosak yang terdedah76.
Pemerhatian histologi keputusan kami menunjukkan bahawa biosurfaktan yang dihasilkan oleh Enterobacter cloacae SJ2 secara ketara mengubah tisu larva nyamuk (Cx. quinquefasciatus) dan anai-anai (O. obesus).Anomali yang sama disebabkan oleh penyediaan minyak selasih di An.gambiaes.s dan An.arabica diterangkan oleh Ochola77.Kamaraj et al.78 juga menerangkan keabnormalan morfologi yang sama dalam An.Larva Stephanie terdedah kepada nanopartikel emas.Vasantha-Srinivasan et al.79 juga melaporkan bahawa minyak pati dompet gembala sangat merosakkan ruang dan lapisan epitelium Aedes albopictus.Aedes aegypti.Raghavendran et al melaporkan bahawa larva nyamuk telah dirawat dengan 500 mg/ml ekstrak miselial kulat Penicillium tempatan.Ae menunjukkan kerosakan histologi yang teruk.aegypti dan Cx.Kadar kematian 80. Sebelum ini, Abinaya et al.Larva instar keempat An telah dikaji.Stephensi dan Ae.aegypti mendapati banyak perubahan histologi dalam Aedes aegypti yang dirawat dengan B. licheniformis exopolysaccharides, termasuk sekum gastrik, atrofi otot, kerosakan dan kekacauan ganglia saraf72.Menurut Raghavendran et al., selepas rawatan dengan ekstrak miselial P. daleae, sel usus tengah nyamuk yang diuji (larva instar ke-4) menunjukkan pembengkakan lumen usus, penurunan kandungan antara sel, dan degenerasi nuklear81.Perubahan histologi yang sama telah diperhatikan dalam larva nyamuk yang dirawat dengan ekstrak daun echinacea, menunjukkan potensi racun serangga bagi sebatian yang dirawat50.
Penggunaan perisian ECOSAR telah mendapat pengiktirafan antarabangsa82.Penyelidikan semasa mencadangkan bahawa ketoksikan akut biosurfaktan ECOSAR kepada mikroalga (C. vulgaris), ikan dan kutu air (D. magna) termasuk dalam kategori "ketoksikan" yang ditakrifkan oleh Pertubuhan Bangsa-Bangsa Bersatu83.Model ekotoksisitas ECOSAR menggunakan SAR dan QSAR untuk meramalkan ketoksikan akut dan jangka panjang bahan dan selalunya digunakan untuk meramalkan ketoksikan bahan pencemar organik82,84.
Paraformaldehid, penimbal natrium fosfat (pH 7.4) dan semua bahan kimia lain yang digunakan dalam kajian ini telah dibeli dari HiMedia Laboratories, India.
Pengeluaran biosurfaktan telah dijalankan dalam 500 mL kelalang Erlenmeyer yang mengandungi 200 mL medium Bushnell Haas steril ditambah dengan 1% minyak mentah sebagai sumber karbon tunggal.Satu prekultur Enterobacter cloacae SJ2 (1.4 × 104 CFU/ml) telah diinokulasi dan dibiakkan pada shaker orbital pada suhu 37°C, 200 rpm selama 7 hari.Selepas tempoh inkubasi, biosurfaktan diekstrak dengan mengempar medium kultur pada 3400 × g selama 20 minit pada 4 ° C dan supernatan yang terhasil digunakan untuk tujuan penyaringan.Prosedur pengoptimuman dan pencirian biosurfaktan telah diterima pakai daripada kajian terdahulu kami26.
Larva Culex quinquefasciatus diperoleh daripada Pusat Kajian Lanjutan dalam Biologi Marin (CAS), Palanchipetai, Tamil Nadu (India).Larva diternak dalam bekas plastik yang diisi dengan air ternyahion pada suhu 27 ± 2°C dan tempoh foto 12:12 (terang:gelap).Larva nyamuk diberi makan larutan glukosa 10%.
Larva Culex quinquefasciatus telah ditemui dalam tangki septik terbuka dan tidak dilindungi.Gunakan garis panduan pengelasan standard untuk mengenal pasti dan menkultur larva di makmal85.Ujian larvikidal telah dijalankan mengikut saranan Pertubuhan Kesihatan Sedunia 86 .SH.Larva instar keempat quinquefasciatus dikumpulkan dalam tiub tertutup dalam kumpulan 25 ml dan 50 ml dengan jurang udara dua pertiga daripada kapasitinya.Biosurfaktan (0-50 mg/ml) telah ditambah kepada setiap tiub secara individu dan disimpan pada suhu 25 °C.Tiub kawalan hanya menggunakan air suling (50 ml).Larva yang mati dianggap sebagai larva yang tidak menunjukkan tanda-tanda berenang semasa tempoh pengeraman (12–48 jam) 87 .Kira peratus kematian larva menggunakan persamaan.(1)88.
Keluarga Odontotermitidae termasuk anai-anai India Odontotermes obesus, ditemui dalam kayu balak reput di Kampus Pertanian (Universiti Annamalai, India).Uji biosurfaktan ini (0–50 mg/ml) menggunakan prosedur biasa untuk menentukan sama ada ia berbahaya.Selepas pengeringan dalam aliran udara laminar selama 30 minit, setiap jalur kertas Whatman disalut dengan biosurfaktan pada kepekatan 30, 40, atau 50 mg/ml.Jalur kertas pra-bersalut dan tidak bersalut telah diuji dan dibandingkan di tengah-tengah hidangan Petri.Setiap cawan petri mengandungi kira-kira tiga puluh anai-anai aktif O. obesus.Kawalan dan uji anai-anai diberi kertas basah sebagai sumber makanan.Semua plat disimpan pada suhu bilik sepanjang tempoh inkubasi.Anai-anai mati selepas 12, 24, 36 dan 48 jam89,90.Persamaan 1 kemudiannya digunakan untuk menganggarkan peratusan kematian anai-anai pada kepekatan biosurfaktan yang berbeza.(2).
Sampel disimpan di atas ais dan dibungkus dalam tiub mikro yang mengandungi 100 ml penimbal natrium fosfat 0.1 M (pH 7.4) dan dihantar ke Makmal Patologi Akuakultur Pusat (CAPL) Pusat Akuakultur Rajiv Gandhi (RGCA).Makmal Histologi, Sirkali, Mayiladuthurai.Daerah, Tamil Nadu, India untuk analisis lanjut.Sampel segera difiksasi dalam 4% paraformaldehid pada suhu 37°C selama 48 jam.
Selepas fasa penetapan, bahan tersebut dibasuh tiga kali dengan penimbal natrium fosfat 0.1 M (pH 7.4), dehidrasi secara berperingkat dalam etanol dan direndam dalam resin LEICA selama 7 hari.Bahan itu kemudiannya diletakkan di dalam acuan plastik yang diisi dengan resin dan pempolimer, dan kemudian dimasukkan ke dalam ketuhar yang dipanaskan hingga 37°C sehingga blok yang mengandungi bahan itu terpolimer sepenuhnya.
Selepas pempolimeran, blok dipotong menggunakan mikrotom LEICA RM2235 (Rankin Biomedical Corporation 10,399 Enterprise Dr. Davisburg, MI 48,350, USA) kepada ketebalan 3 mm.Bahagian dikumpulkan pada slaid, dengan enam bahagian setiap slaid.Slaid dikeringkan pada suhu bilik, kemudian diwarnai dengan hematoxylin selama 7 minit dan dibasuh dengan air mengalir selama 4 minit.Selain itu, sapukan larutan eosin pada kulit selama 5 minit dan bilas dengan air mengalir selama 5 minit.
Ketoksikan akut telah diramalkan menggunakan organisma akuatik dari paras tropika yang berbeza: ikan 96 jam LC50, D. magna LC50 48 jam, dan alga hijau 96 jam EC50.Ketoksikan biosurfaktan rhamnolipid kepada ikan dan alga hijau dinilai menggunakan perisian ECOSAR versi 2.2 untuk Windows yang dibangunkan oleh Agensi Perlindungan Alam Sekitar AS.(Terdapat dalam talian di https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model).
Semua ujian untuk aktiviti larvikidal dan antianai telah dijalankan dalam tiga kali ganda.Regresi tak linear (log pembolehubah tindak balas dos) data kematian larva dan anai-anai telah dilakukan untuk mengira kepekatan maut median (LC50) dengan selang keyakinan 95%, dan keluk tindak balas kepekatan dijana menggunakan Prism® (versi 8.0, GraphPad Software) Inc. , AS) 84, 91.
Kajian ini mendedahkan potensi biosurfaktan mikrob yang dihasilkan oleh Enterobacter cloacae SJ2 sebagai agen larvikidal dan antianai nyamuk, dan kerja ini akan menyumbang kepada pemahaman yang lebih baik tentang mekanisme tindakan larvikidal dan antianai-anai.Kajian histologi larva yang dirawat dengan biosurfaktan menunjukkan kerosakan pada saluran pencernaan, usus tengah, korteks serebrum dan hiperplasia sel epitelium usus.Keputusan: Penilaian toksikologi ke atas aktiviti antianai dan larvikidal biosurfaktan rhamnolipid yang dihasilkan oleh Enterobacter cloacae SJ2 mendedahkan bahawa isolat ini merupakan biopestisid yang berpotensi untuk mengawal penyakit bawaan vektor nyamuk (Cx quinquefasciatus) dan anai-anai (O. obesus).Terdapat keperluan untuk memahami ketoksikan alam sekitar yang mendasari biosurfaktan dan potensi kesan alam sekitarnya.Kajian ini menyediakan asas saintifik untuk menilai risiko alam sekitar biosurfaktan.
Masa siaran: Apr-09-2024